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本试剂应用的是胶体金法中的胶体金免疫层析法。
1.将检测条放置于洁净干燥的工作台上。
2.用本试剂盒提供的吸管或自备的洁净的加样器取样品货增菌样品2滴，滴加到检测条样品加入端，开始计时
3.2-15分钟内观察结果，15分钟后结果不计。
水样直接检测，
增菌检测：
粪便标本：将送检样本取1克立即接种于9ml的mec肉汤中，37度恒温摇床培养6h
食物标本：将25克标本磨碎，立即接种于225ml的mec肉汤中,37度恒温摇床培养9h
水源标本：将400ml水源标本，立即接种于5倍浓缩的mev肉汤中，37度恒温摇床培养16-20h
建议使用增菌液为添加20mg/ml新生霉素的ec肉汤。
免疫胶体金技术的基本原理：
胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合，由于这种结合是静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。 胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其它生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。 胶体金标记，实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷，与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。
胶体金免疫层析法
将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。 |
