无论是海水还是淡水水体中,都有着微生物生长所必需的营养, 处于城镇等人口聚集地区的湖泊、河流等淡水中主要是一些能分解各种有机物的腐生菌,如芽孢杆菌、生孢梭菌、变形杆菌、大肠杆菌、粪链球菌等。有的甚至还含有伤寒、痢疾、霍乱、肝炎等人类病原菌。
那么人们关心的生活饮用水细菌卫生标准是:细菌总数﹤100个/mL,大肠菌群值﹤3个/L。
下面介绍水中微生物的检测。
作用:判定食品被细菌污染的程度及卫生质量的优劣,对被检样品做出适当的卫生学评价。
细菌总数(aerobic Lacterial count):指水样在一定的条件下培养后(如培养基成分和pH、培养的温度和时间以及需氧性质等)l ml检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果,只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。
4、仪器
4.1 三角瓶。
4.2 量筒。
4.3 pH计或精密pH试纸.
4.4 高压消毒锅.
4.5 试管。
4.6 灭菌平皿:直径9 cm .
4.7 灭菌刻度吸管:10mL、2mL、1mL .
4.8 酒精灯。
4.9 恒温培养箱。
4.10 放大镜。
5、培养基和试剂
5.1 营养琼脂培养基。
5.2 10 %(m/m)硫代硫酸钠溶液,121℃ 高压灭菌20min .
6、操作步骤
6.1 采样瓶的要求和预处理:用于微生物分析的采样瓶要无酸、无碱、无毒的玻璃容器。采样瓶在灭苗前加人足量的10%(m/m)硫代硫酸钠溶液。一般情况下125mL的采样瓶加0.1ml,加完后121℃高压灭菌20min。
6.2 用灭菌吸管吸取均匀水样1mL,注人到灭菌平皿内,另取1mL注人另一灭菌平皿内作平行接种.取lmL加到9mL无菌生理盐水中作1 : 10稀释,混匀后取ZmL分别加到两个无菌平皿内,每皿1mL。
6.3 将溶化并冷却至45℃的营养琼脂培养基倾注平皿内,每皿约15mL,另取一个不加样品的平皿作空白对照。立即旋摇平皿,使水样和培养基充分混匀。待琼脂凝固后翻转平皿.置36℃士1℃恒温箱内培养48h。
7、菌落计数方法 先用肉眼观察,点数菌落数,然后再用放大5——10倍的放大镜检查,以防遗漏.记下各平皿的菌落数后.求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样苗落蔓延生长时,该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中茵落分布又很均匀时.则可将此半个平皿菌落计数后乘以2,所得结果代表全皿菌落数。
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