当前，食品安全问题已成为全球关注的重要议题，而有害微生物污染也成为食品安全中的一项主要控制指标。食品中有害微生物主要有有害细菌、霉菌、大肠菌群等，食品生产企业在生产过程中普遍存在有害物质，包括有害微生物的交叉污染。要控制食品原料、产品中有害微生物，首先必须要有能够准确快速的有害微生物捡测方法。经典的标准检测方法往往比较费时，所以有害微生物快速检测方法成为近年来的研究热点。本文根据近年来国内外已发表的研究文献，总结有害微生物快速检测方法的研究进展，供参考。

　　1　食品中有害微生物快速检测方法研究进展

　　1.1　生物传感器技术

　　生物传感器（biosensor）是指对生物物质敏感并能将其浓度转换为电信号进行检测的仪器；生物传感器又分为：酶生物传感器、微生物传感器和免疫传感器。它们具有成本低、体积小、灵敏度较高的优点；能从腐败或者半腐败的食品、饲料中得到实时而快速、多样化的分析检测结果。

　　1.2　基因芯片技术

基因芯片技术是在生命科学领域迅速发展的新型食源性检测技术。该法把微电子光刻技术与DNA化学合成技术相结合，大大提高了基因芯片的探针密度，且试剂用量减少，可以实现标准化和批量化大规模生产，有很大的发展潜力。将基因芯片技术与其它技术结合起来，能达到更好的效果。

该法具有高通量、高准确性和高灵敏度，检测时间短，可同时检测多种有害微生物，可以作为临床鉴定细菌的一个重要的方法。将广泛应用于食品饲料安全控制，突发性食品安全事件检测，出入境检验检疫等，但检测费用昂贵。

　　1.3　聚合酶链式反应技术

　　聚合酶链式反应（PCR）是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，具有特异性强、灵敏度高、简便快速和对标本的纯度要求低等优势；不过检测样品较多时工作量大。在食品安全越来越严峻的形式下，许多科技工作者试图多种检测方法联用，达到解决上述问题的目的。将多种检测方法联用，旨在弥补单一检测方法的局限性。目前国际上研究的热点有多重荧光实时PCR检测技术，兼具多重PCR和荧光实时PCR技术的实时定量检测监控PCR产物两方面的优点。

　　1.4　生物阻抗法

　　生物阻抗法的原理是利用由微生物新陈代谢引起的培养基电学特性变化快速检出样品中微生物的含量。阻抗法具有能区分活细胞和死细胞的优势，而死细胞常常无致病性，保障食品与饲料安全的关键就是检验活细胞的数量。与传统培养基法检测结果相比，阻抗法的检测结果准确可靠，能够将检测时间缩短至72h。此法检测速度很快，但只能确定污染程度。

　　1.5　蛋白质芯片技术

　　蛋白质芯片技术又称蛋白质（微）阵列，是指将已知的大量蛋白质（如酶、抗原、抗体、受体、配体、细胞因子等）固定在经化学修饰的固相载体（璃片、硅片等）上，在保留蛋白质物化性质的基础上，蛋白质与载体表面结合，再用激光扫描系统或者电感耦合器件获取相关图像；然后用专门的计算机软件分析图像、定性定量结果。Howell等采用俗称软蚀刻的微接触印刷技术（microcontact printing，CP）制作出了一种可以检测大肠杆菌E。coli O157∶H7及鲑肾杆菌（renibacterium salmoninarum）的抗体微阵列，结果表明：此芯片与其他有害微生物的交叉反应少， 检出浓度为7×107cfu／ml，检测时间是40min，是一种很有效的微生物检测方法。

　　在生命科学的各个研究领域有很好的发展前景，但同基因芯片技术一样，检测费用高，发展还不成熟。

　　1.6　纳米金标记技术

　　纳米金标记技术是指直径在1nm——100nm金的微小颗粒，具有高电子密度，介电特性和催化作用，可以与多种生物大分子结合，且不影响生物大分子的生物活性。近年来，基于纳米金标记的快速检测研究在有害微生物方面应用比较多，检测的微生物种类也比较多，国内外科技工作者通过对纳米金颗粒表面特性的处理以及在纳米金颗粒表面标记上特定的寡核苷酸探针，开发研究出了新的微生物检测系统。

　　此技术具有简单、快速、灵敏度高、特异性强、价廉、样品所需量少等优点，适合现场筛选，在饲料检测中有着广泛的应用价值和发展前景。

　　2　食品中有害微生物快速检测设备

　　目前，生物学领域的专家通过对微生物快速检测方面深入的研究，开发了一系列技术，有ATP荧光仪、多功能微生物荧光检测仪、微生物实时光电检测系统、纸片法。这些用于食品中有害微生物的快速检测技术，未来同样可以在食品中应用，这些方法的应用将为食品安全提供有力的保障。下面重点介绍常用的两种有害微生物快速检测设备。

　　2.1　RVLM 型微生物快速检测系统

　　由德国皇家生物科技公司生产的高性能便携式微生物检测仪将多种检验方法的优点集合应用，如培养皿法、酶法（β——葡萄糖苷酸酶分析）、免疫法（抗原搜寻）、基因法（基因搜寻），具有便捷、操作简单、检验迅速、高灵敏性、高特异性、消耗成本低、定性半定量测量等诸多优点。

　　2.1.1　快速检测对象

　　活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、肠球菌、产气荚膜梭菌、亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌、霉菌（曲霉属真菌、曲霉菌）、酵母菌、军团菌等，可以定量检测。

　　2.1.2　快速检测产品特点

　　应用范围广：应用于食品、饲料、药品、水质、空气微生物检测等众多领域，可检测固态、液态、气态及膏状、浆状等多种样本。

　　使用方便：一套便携系统即可完成采样、实验、后处理等工作，无需配备多种检测仪器。

　　操作简单：检测样本只需1ml或1g，且无需前处理，只需3个步骤就可完成操作。

　　高灵敏度：可检测到数量级为1cfu的目标微生物，满足国内国际微生物检测标准。

　　高特异性：特异性高达99.999％，杜绝非目标微生物造成的实验干扰。

　　准确度高：可100％定量分析。

　　检测数量：8个插槽可同时提供8项不同实验，13类不同标准培养环境。

　　快速检测：最快10min即可得到检测结果，可用于现场检测。

　　高智能化：能够自动控制孵育温度和孵育时间，并可自动生成实验报告。

　　全自动化：独立、持续地检测并记录瓶中的微生物数量（cfu）。

　　在欧洲的实验室中，80％——90％的微生物检测实验采用的仪器是RVLM 型微生物检测系统，其超高的灵敏度可以满足欧盟及国内检测标准。RVLM型微生物快速检测是目前业内最高端的智能优质微生物检测仪。